溶菌酶(Lysozyme)又稱(chēng)胞壁貭酶(muramidase),是一種破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,能夠提高蛋白或核酸提取效率。
其主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性唐肽,
導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。
因革蘭氏陽(yáng)性菌(G+)的細(xì)胞壁內(nèi)肽聚糖含量很高,故對(duì)溶菌酶非常敏感。
反之,革蘭氏陰性菌(G-)敏感性較弱。
當(dāng)體系中含EDTA時(shí),能夠螯合細(xì)菌外膜的Ca2+,可以提高G-的敏感性。另外,使用溶菌酶對(duì)大腸桿菌裂解時(shí),
當(dāng)加入核酸酶如DNase Ⅰ,能明顯提高效率。
產(chǎn)品特性
1)純化自雞蛋清(egg white);
2)不含RNase、DNase和Protease;
3)在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 6-9.0)均有活性。與pH為9.2時(shí)相比,pH為6.2時(shí)可在更廣的離子強(qiáng)度(0.02 -0.10 M)范圍內(nèi)觀(guān)察到最大活性。
4)活力單位>100000U/mg。
產(chǎn)品應(yīng)用
細(xì)胞壁降解,原生質(zhì)體制備,溶菌,分離核酸前的樣品制備和藥理學(xué)研究等DNA/RNA 實(shí)驗(yàn), DNA/RNA 分離及從包涵體中純化蛋白
1. 裂解細(xì)胞壁:
溶菌酶廣泛應(yīng)用于裂解微生物菌體,破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁,是催化細(xì)菌細(xì)胞壁
肽聚糖N-乙酰氨基葡糖與N-乙酰胞壁酸之間的1,4-β-糖苷鍵水解的酶。
革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁含有高比例的肽聚糖,易被溶菌酶溶解。
革蘭氏陰性菌因?yàn)殡木厶呛康图昂型饽ざ灰妆涣呀?,可以通過(guò)加入EDTA 加速裂解,因?yàn)镋DTA能夠螯合在外膜的金屬離子。
2. 水解甲殼素:
溶菌酶也可以水解甲殼素低聚糖。
3. 核酸制備:
DNA/RNA 實(shí)驗(yàn), 用于DNA/RNA 的分離。
4. 質(zhì)粒制備(分解膜和細(xì)胞壁):
可以在大腸桿菌中純化質(zhì)粒DNA時(shí)作為裂解試劑。
5. 從包涵體中純化蛋白